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人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA試劑盒檢測說明
點擊次數(shù):1292 更新時間:2018-05-15

人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA試劑盒檢測說明由上海遠(yuǎn)慕生物提供,本司提供ELISA試劑盒免費代測服務(wù),所供應(yīng)的產(chǎn)品非常多,ELISA試劑盒種屬成千上萬,有:大鼠,小鼠,人,植物,馬,兔,雞,鴨,豬,犬,植物,豚鼠及其他,歡迎訂購!

人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA試劑盒檢測說明

人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA試劑盒檢測說明

 

【信息說明】

中文名:人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA試劑盒

中文別名:人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA kit

供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格:48t/96t

保存:2~8℃

有效期:6個月

樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

特點:敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。

用途:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。

種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。

檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

 

【技術(shù)原理】

1、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。

2、結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。

3、酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。

4、受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。

5、此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

6、加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

7、測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。

 

【操作步驟】

1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。

4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。

6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對照孔不加。

7、溫育:重復(fù)4的操作。

8、洗板:重復(fù)5的操作。

9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。

10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。

12、計算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

 

【注意事項】

1、嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2、洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3、消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4、底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5、避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。

6、在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。

7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8、任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

9、不能使用過期產(chǎn)品。

10、如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

 

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